原代细胞(Primary Cells)是指直接从活体组织中分离获得的细胞,代表了原始组织的特性和功能。它的来源是生物体,根据细胞本身特性采取不同的分离方法提取出高纯度的目的细胞。与细胞系相比,原代细胞更能代表体内细胞的真实状态,因此在生物医学研究、药物开发和毒性测试等领域具有不可替代的价值。
原代细胞与细胞系的主要区别在于群体倍增能力和遗传稳定性。原代细胞只能有限地传代(通常不超过10代),而细胞系则可以通过多次传代维持其生长能力。此外,原代细胞在无遗传修饰的情况下保留了其来源组织的许多重要生理特性,因此在研究中更具代表性。
原代细胞的独特优势
①更接近体内生理状态:保留组织特异性功能(基因表达谱、代谢特征和功能特性)和形态特征,更接近体内真实状态。
②遗传背景未改变:未经过永生化或基因改造处理,遗传稳定性高,细胞系长期培养会发生形态和遗传信息改变。
③专业认可:高质量期刊更认可原代细胞的实验结果。
④异质性:更接近原始组织的细胞组成。
原代细胞的获取方法
原代细胞的常规获取主要依赖于两种方法:组织块法和消化法。
1、组织块法:适用于来源有限、数量较少的组织。将组织切成小块,直接接种于培养基中,部分细胞会黏附并生长。
2、消化法:将组织块用消化液(如胰蛋白酶、胶原酶等)处理,分散成单细胞悬液,再接种于培养基中培养。
原代细胞的应用方向
原代细胞因其保留了细胞的原始生物学特性,被广泛应用于多种实验研究中:
1、药物筛选与药效评估:用CCK8、MTT、Brdu、Edu等检测法用于评估药物对细胞的影响。
2、细胞分化研究:常见角质形成细胞、软骨细胞、神经干细胞等的分离与培养。
3、疾病机制研究:癌症、代谢性疾病等的机制研究,例如人原代椎间盘髓核细胞可用于研究椎间盘退行性病变的机制。
4、毒理学研究:用于评估药物或化学物质对细胞的毒性作用,例如原代角膜上皮细胞可用于眼科相关研究。
5、基础生物学研究:适用于细胞周期、凋亡、迁移、侵袭等实验。
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